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ELISA試驗(yàn)三大常用辦法優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)

發(fā)布日期:2024-02-20 17:15:44   瀏覽量 :583
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、直接法  
將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無(wú)須運(yùn)用二抗可防止交互反響。
下風(fēng):試驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對(duì)前進(jìn)。

、ELISA試劑盒間接法  
此測(cè)定辦法與直接法類似,不同在于一級(jí)抗體沒有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。
優(yōu)勢(shì):二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),并且有多種選擇能做不相同的測(cè)定分析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保留它多的免疫反響性。
下風(fēng):交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。


三、雙抗體夾心法  
被檢查的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢查抗體,此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量;或不符號(hào),再透過酶符號(hào)的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體有必要留心選擇,才可防止交互反響或比賽相同的抗原結(jié)合部位。
優(yōu)勢(shì):高活絡(luò)、高專一性,抗原無(wú)須事前純化。
下風(fēng):抗原一定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。

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