1、預(yù)處理
新超濾管:使用前用純水浸泡,冰箱預(yù)冷10 min。然后將水倒出,置于冰上預(yù)冷2-5 min,加樣。
舊超濾管:倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液,用純水沖洗干凈10遍(注意水流速盡量平緩,防止沖破濾膜),置于冰上預(yù)冷2-5 min,加樣。
2、加樣
如超濾管中有少許殘留水可將超濾管內(nèi)管倒置1000×g離心1 min,移液槍移取適量樣本加入超濾管中。
3、離心
配平,12000 ×g離心(15-30 min),等達到目的轉(zhuǎn)速后方可離開。
4、樣本收集
外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清,如需取濃縮后樣本用于其他實驗,則另取外管,內(nèi)管倒置,1000×g離心1-2 min。
5、超濾管清洗
使用完的超濾管用純水反復(fù)清洗5次,再用75%乙醇沖洗3次。
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