直接法（Direct ELISA）

原理：將抗原或抗體固定于酶標(biāo)板上，然后用酶標(biāo)抗體或抗原直接檢測(cè)。

直接法將抗原或抗體固定到酶標(biāo)板上，用帶有酶標(biāo)記的一級(jí)抗體或一級(jí)抗原，與之特異性結(jié)合，再利用酶催化底物顯色，即可測(cè)定總靶標(biāo)蛋白的含量。

間接法（Indirect ELISA）

原理：將抗原或抗體固定于酶標(biāo)板上，隨后分兩步進(jìn)行檢測(cè)：首先加入檢測(cè)抗體或抗原進(jìn)行特異性結(jié)合，隨后加入酶標(biāo)二抗檢測(cè)并利用底物顯色。

間接法常用于檢測(cè)抗體。將抗原固定到酶標(biāo)板上，加入一抗，與抗原特異性結(jié)合，再加入帶有酶標(biāo)記的二抗，使二抗與一抗特異性結(jié)合，最后加入底物，使底物與酶反應(yīng)顯色，即可測(cè)定總靶標(biāo)蛋白的含量。

夾心法（Sandwich ELISA）

夾心法分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法。

雙抗體夾心法：此方法常用于檢測(cè)抗原。將抗體固定在固相載體上，加入待測(cè)抗原，與抗體特異性結(jié)合，再加入酶標(biāo)抗體檢測(cè)，并利用底物顯色，即可測(cè)定總靶標(biāo)蛋白的含量。

雙抗原夾心法：反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似，用固相抗原和酶標(biāo)特異性抗原，分別代替固相抗體和酶標(biāo)特異性抗體，即可測(cè)定樣品中的抗體。

夾心法ELISA的顯色結(jié)果與待檢抗原（或抗體）的量成正比。

競(jìng)爭(zhēng)法（Competitive ELISA）

原理：樣本中的抗原及預(yù)包被的酶標(biāo)抗原，競(jìng)爭(zhēng)性地與固相抗體相結(jié)合。樣本中的抗原含量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原就越少，最終顯色也越淺。需要注意的是，顯色結(jié)果與待檢抗原（或抗體）的量成反比。

預(yù)先將抗原包被在固相載體上，并加入酶標(biāo)記的特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，加入待檢抗原（或抗體），如果待檢物是抗原，則待檢抗原與預(yù)先包被在固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)抗體；如果待檢測(cè)物是抗體，則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合包被在固相載體上的抗原。通過洗滌洗掉被競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的酶標(biāo)抗體，最后加底物顯色。

競(jìng)爭(zhēng)法顯色結(jié)果與待檢抗原（或抗體）的量成反比，且適用于測(cè)定只有一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的小分子物質(zhì)。

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